Expression transitoire du gène de la fi-glucuronidase (Gus) dans les protoplastes de mil (Pennisetum glaucum (L) R.) : étude comparative de deux promoteurs, CaMV35S et Emu

Résumé

Français

L’activité du gène Gus, sous le contrôle de deux promoteurs, le CaMV35S avec le plasmide p35SGus et
le Emu avec le plasmide pEmuGN, a été étudiée. Pour 10” protoplastes, soumis à 20 microgrammes (p,g)
de DNA plasmidien et 20 pg CT-DNA, pendant 3 min. en présence de PEG (20 %), une activité Gus de
20 à 40 nmoles de MU / h / mg de protéines est observée pour le p35SGus contre 250 à 400 nmoles de
MU / h / mg de protéines pour le pEmuGN. Cette activité triple quand la quantité du plasmide double et
reste stable quand le temps d’incubation augmente. Dès 4 h après la transformation, l’activité Gus est
détectée avec le pEmuGN contre 8 h pour le p35SGus. L’ activité Gus augmente quand la concentration
du PEG augmente. Le promoteur Emu a une activité 8 à 11 fois supérieure à celle du promoteur
CAMV35S.

Anglais

A comparative study for Gus gene under CaMV35S promoter with p35SGus plasmid and under Emu promoter
with the pEmuGN plasmid has been done. For 20 pg of plasmid, 20 pg of CT-DNA and PEG 20 %
used in 10” protoplasts transformation during 3 min., the Gus activity was from 20 to 40 nmoles of MU/h
x mg of proteines for p35SGus and from 250 to 400 nrnoles of MU/h x mg of proteines for pEmuGN. This
Gus activity trebled when the plasmid quantity doubles. The increasing of incubation time does not modify
the Gus activity. TO detect Gus activity, 4 h are enough for pEmuGN and for p35SGus, it needs 8 h.
The Gus activity increases when we increase PEG concentration. The Emu promoter activity is eight to
eleven times superior to the CaMV35S promoter activity.